TaqDNA聚合酶无3'→5'外切酶活性。因而无校正功能,在复制新链的过程中会发生碱基错配。TaqDNA聚合酶在每次循环中产生的碱基替换率为1/8000,故扩增的片段越长,错配的机率越高。PCR是由美国科学家穆利斯提出的一种体外简...
7. 引物3’端不可修饰。引物3'端的末位碱基对Taq酶的DNA合成效率有较大的影响。不同的末位碱基在错配位置导致不同的扩增效率,末位碱基为A的错配效率明显高于其他3个碱基,因此应当避免在引物的3'端使用碱基A。8. 引物...
普通 Taq 酶的错配率在 10 -5 碱基 / 循环数,而高保真 Taq 酶错配率可降到 10 -6 数量级,大大降低了出错的可能性;它适合对 PCR 保真性要求较高的实验,如基因筛选、测序、突变检测等等。高保真 Taq 酶的保真...
天跟的普通taq酶,没有高保真性能,只能用来做检测,但是做克隆,错配率较高,如果只有它能P出来就测序多测几个单克隆,正确的要就可以了!希望可以帮到你!
Taq 酶保真性不高的特点发展易错 PCR 技术 ,即通过改变 PCR 条件来提高扩增产物中错误碱基引入的频率 ,从而扩增基因文库。Taq酶是一种对热具有一定稳定性的DNA聚合酶,因为在PCR中,有一个循环,而且不同阶段需要的温度不...
使用Taq DNA聚合酶的PCR反应出现碱基错配的几率为2.1×10-4左右。和其他许多聚合酶一样,Taq DNA聚合酶是Mg2+依赖性酶,该酶的催化活性对Mg2+浓度非常敏感。以鲑鱼精子DNA为模板,dNTP的浓度为0.7~0.8 mmol/L时,...
普通Taq酶的错配率在2-5X10-5碱基/循环数,而高保真Taq酶错配率可达10-6数量级,大大降低了出错的可能。其原理主要是因为高保真Taq酶具有3'到5'核酸外切酶(Proofreading)的活性,扩增途中如果产生了错配的碱基,它可以...
不能用普通酶扩增 16s测序主要为了鉴定菌种,通常在做鉴定的时候区分标准是97%,区分亚种和菌株的时候相似度更高。普通TAQ酶的复制错误率较高,可能在扩增过程中引入错误,这些错配可能导致相似度下降从而分类错误。
Taq酶扩增的PCR产物,3’末端总是带有1个非模板依赖型的突出碱基,而这个碱基几乎总是A,因为Taq酶对dATP具有优先聚合活性,故可用T载体克隆。缺点无3’→5’阅读校正功能,在PCR扩增过程可引起错配,30次循环错配率约0....
高保真其实是指的所用的Taq酶的保真度,两者区别也就在与所用的Taq酶,保真度高P出来准确度就高,当然价钱就高。如果是平时在实验室的实验用普通的就可以了,没必要买高保真的。