总体看曲线拐点清楚,指数期明显,扩增曲线整体平行性极好,基线平无上扬现象,低浓度样本扩增曲线指数期明显。2. 曲线指数期斜率,反应了扩增效率,越大说明扩增效率越高。扩增效率越高,试剂灵敏度表现会越好。3. 基线,图...
不过S型的曲线,曼妙的身材,我还是很满意的。大家也根据我将PCR进程分为4个时期,分别为基线期,指数增长期,线性增长期和平台期。我的特征还是很明显的:基线期平整;指数期起峰,陡度较大;线性期慢慢趋于平整;平台期...
a基线期b指数增长期c线性增长期 pcr扩增曲线四个阶段为:基线期,指数增长期,线性增长期,平台期。聚合酶链式反应(PCR)是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特...
这是因为DNA复制量未达到仪器检测到的水平,但实际PCR循环却真实进行,反映在仪器曲线上为基线,直到量变达到质变时,才会被仪器检测到,变成指数增长期。一般把荧光PCR的前15个循环信号作为荧光本底信号(baseline,基线期),...
你的背景太高了,降低探针用量!
一般在荧光定量PCR中会用到扩增曲线。描述PCR动态进程的曲线即为扩增曲线,在进行PCR反应过程中,通过检测系统对PCR管内的样品进行实时检测,最后将荧光信号值通过成像技术显现在电脑上。正常的扩增曲线包括四个阶段:基线期,...
最常见的是样本的扩增效率很差,所以到了平台期也不是很强,这样基线就相对很高了。
探针浓度过高;体系中有荧光物质污染;扩增效率低
如果扩增效率一致,不同Ct的曲线显示出来就基本是平行的位移,其倾斜程度基本一致。而如下图一样,一条比较“陡”,另一条比较“平”,那么意味着扩增效率不一致。有可能是引物效率不一,或者个别样品、反应孔存在抑制PCR的...
作QPCR的标准曲线可以用PCR-ELISA法作。具体如下:PCR-ELISA法:利用地高辛或生物素等标记引物,扩增产物被固相板上特异的探针所结合;再加入抗地高辛或生物素酶标抗体-辣根过氧化物酶结合物,最终酶使底物显色。常规的PCR...