检测外泌体中的miRNA通常需要经过以下步骤:外泌体提取:首先,从细胞培养上清液、血浆、尿液等样品中提取外泌体。可以使用商用的外泌体提取试剂盒,按照厂家提供的操作说明进行提取。总RNA提取:从提取的外泌体样品中提取总RN...
外泌体的分析方法有以下几种:1.蛋白分析(1)SDS-PAGE:通过SDS-PAGE电泳可以分析得到的Exosome中蛋白的含量及种类。(2)Western-Blot:通过Western-Blot可以检测Exosome中特定的蛋白表达情况。(3)2-DE等蛋白组学分析:可以了解Exosome中不...
1、筛选差异表达的RNA,进一步研究其在生物过程中的功能和机制。2、通过比较不同实验组和对照组的蛋白质表达差异,可以筛选出潜在的生物学效应相关蛋白。3、通过比较不同实验组和对照组的蛋白质表达差异,可以筛选出潜在的...
(4)外泌体高通量检测 : 外泌体内含有与细胞来源相关的蛋白质和核酸,可以运输蛋白质、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA等进入受体细胞,参与细胞间通讯。不同细胞来源的外泌体所含有的蛋白成分和RNA不太相同,可作为多种疾...
到目前为止,只有少数报道对从人类生物液体中分离的EV中的小RNA货物进行了下一代测序。这些研究表明,从人血浆、唾液和尿液中分离出的外泌体含有相当比例的miRNA reads(35-76%)。上述生物流体EV中其余的RNA种类包括rRNA、lnc...
高通量测序又称NGS,重新定义了基因组学研究。近年来,NGS技术稳步发展,伴随着成本下降以及测序应用呈指数增加。本文,我们研究了影响测序文库质量的关键因素,以及,在DNA来源和RNA来源文库准备过程中存在的挑战。这些因素包括,DNA/RNA材料的定...
目前更先进的方法是通过紫外线照射以交联复合物,然后开展深度测序以鉴定发现的RNA,这种方法被称为紫外交联免疫沉淀结合高通量测序(HITS-CLIP),或CLIP-seq。利用这种方法来寻找miRNA的靶基因,能够明显降低miRNA结合位点的假...
超速离心是先通过低速离心去除细胞和细胞凋亡碎片,再通过超高速去除大囊泡和沉淀外泌体。此方法耗时耗力,往往需要8-30个小时;且需要大量的起始材料和超速离心机;产量不高。希吉亚外泌体美容机制Ø 免疫磁珠法:利用...
区别是一个针对microRNA,微小RNA。另一个针对mRNA,信使RNA。microRNA测序区别于芯片分析方法。直接测出小片段的序列然后用生物统计方法合并区段等最终计算出表达差异。microRNA芯片与microRNA测序是用不同平台研究同样的问题。
他举例,近年也透过鼻腔干细胞培植出可促进神经细胞再生的细胞,因鼻腔干细胞的细胞型态与神经类似,筛选当中的外泌体(exosome)和微糖核甘酸(miRNA),大量培养后植入用以修补受损的神经细胞,合并其「脊椎神经绕道重建手术」...
外显子组测序是指利用序列捕获技术将全基因组外显子区域DNA捕捉并富集后进行高通量测序的基因组分析方法。外显子测序相对于基因组重测序成本较低,对研究已知基因的SNP、Indel等具有较大的优势,但无法研究基因组结构变异如染色体断裂重组等...